PCR 與凝膠電泳
擴增 DNA 序列並按大小分離片段。
實驗方案
主要目標
了解通過 PCR 進行 DNA 擴增的原理,以及使用瓊脂糖凝膠電泳按大小分離 DNA 片段的原理。
實驗步驟
- 1
準備 PCR 反應混合液 (模板、引物、dNTPs、Taq 聚合酶)。
- 2
將熱循環儀設置為運行 20-30 個「變性、退火、延伸」循環。
- 3
在結果圖表中觀察 DNA 副本的指數增加。
- 4
將擴增後的 DNA 樣本加入瓊脂糖凝膠的孔中。
- 5
將 DNA 分子量標準 (參考標準) 加入另一個孔中。
- 6
施加電場 (100V),讓片段向正極遷移。
- 7
分析產生的條帶以確定擴增產物的大小。